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Hyclone胎牛血清為何如此重要
發(fā)布日期：
2019-02-12
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Hyclone胎牛血清在大部分的細胞培養(yǎng)中是不需要滅活的，但在免疫學研究中，培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。Hyclone胎牛血清有較好的促細胞生長作用及產品穩(wěn)定性。內毒素含量小于10EU/ml，血紅蛋白含量小于10mg/dl。此血清可以廣泛用于細胞培養(yǎng)，包含干細胞系的培養(yǎng)。
Hyclone胎牛血清保存方法：
1、需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會被破壞，而影響血清質量。如果一次無法用完一瓶,可將40～45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前，必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現Hyclone胎牛血清有懸浮物,則可將Hyclone胎牛血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾Hyclone胎牛血清。
3、瓶裝Hyclone胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40～45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。
4、熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量.補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。
5、血清（例如：Hyclone南美血清）中的沉淀物絮狀物:主要是Hyclone胎牛血清中的脂蛋白變性及解凍后Hyclone胎牛血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清（例如：Hyclone南美血清）質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。
HyClone胎牛血清具有極為重要的作用，其包括：
1、提供對維持細胞指數生長的激素，基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2、提供結合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結合或調變它們所結合的物質活力。
3、有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合，起到解毒作用。
4、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。
5、起酸堿度緩沖液作用。
6、提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。
Hyclone胎牛血清是品質的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較少。
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